Практикум по молекулярной биологии, Юнусова Н.В., Кузьменко Д.И., Кайгородова Е.В., 2017

Практикум по молекулярной биологии, Юнусова Н.В., Кузьменко Д.И., Кайгородова Е.В., 2017.

   Практикум включает описание методов очистки и разделения белков, определения молекулярной массы белков, методов препаративного центрифугирования, ультрацентрифугирования, получения экзосом и их применения в области молекулярной биологии.
В пособии дана характеристика методов культивирования клеток животных и человека, использования клеточных культур при изучении процессов роста, деления, опухолевой трансформации, эпителиально-мезенхимального перехода, опухолевой прогрессии и гибели клеток.
Настоящий практикум включает описание современного молекулярного метода in situ гибридизации и его основного варианта FISH (флуоресцентная in situ гибридизация), который позволяет обнаружить любые генетические нарушения в клетке.
Практикум подготовлен в соответствии с федеральным государственным образовательным стандартом высшего образования по специальности 30.05.01 - Медицинская биохимия. Пособие также может быть использовано студентами медицинских и биологических специальностей.




МЕТОДЫ ОЧИСТКИ И РАЗДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ.
Цель практического занятия: освоить способ очистки белковых растворов методом их обессоливания на колонке с сефадексом G-25. Научиться определять внутренний и наружный (свободный) объемы хроматографической колонки, элюционный объем.

Теоретическая часть.
Разделение смеси молекул по их размерам и форме с помощью хроматографических методов основано на эффекте молекулярного сита. Этот эффект свойствен многим пористым материалам. В хроматографии для этих целей применяют различные органические полимеры с трехмерной сетчатой структурой, придающей им свойства геля. Материал гелей химически инертен ко всем реагентам и компонентам разделяемой смеси.

Разделение смеси веществ при помощи гелей, основанное на различиях размеров молекул, образующих смесь, называется гель-фильтрацией (синонимы: гель-проникающая хроматография, молекулярно-ситовая хроматография). Все виды разделения молекул, основанные на принципе молекулярного сита, относятся к проникающей хроматографии.

ОГЛАВЛЕНИЕ.
Введение.
ТЕМА 1. Методы очистки и фракционирования белков.
Занятие 1.
Лабораторная работа №1. Обессоливание белковых растворов фильтрованием через гель сефадекса G-25.
Занятие 2.
Лабораторная работа №2. Разделение смеси белков методом ионообменной хроматографии на карбоксиметилцеллюлозе.
Занятие 3.
Лабораторная работа №3. Высаливание белковых фракций. Фракционирование протеасом с определение химотрипсиноподобной активности 26S и 20S пулов протеасом.
ТЕМА 2. Молекулярные основы in situ гибридизации.
Занятие 1.
Лабораторная работа №4. Определение наличия амплификации гена Her2/neu в опухолевых клетках методом FISH.
ТЕМА 3. Межклеточный информационный поток - внеклеточные
РНК и внеклеточные везикулы.
Занятие 1.
Лабораторная работа №5. Получение препарата внеклеточных везикул - экзосом из биологических жидкостей методом ультрацентрифугирования с ультрафильтрацией.
ТЕМА 4 МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССЫ БЕЛКОВ.
Лабораторная работа №6. Определение молекулярной массы белков фильтрованием через гель сефадекса G-100.
ТЕМА 5. Основы культивирования клеток.
Занятие 1.
Лабораторная работа №7. Основы культивирования клеток. Работа с адгезивными и суспензионными культурами. Подсчет клеток при культивировании.
Литература.



Бесплатно скачать электронную книгу в удобном формате, смотреть и читать:
Скачать книгу Практикум по молекулярной биологии, Юнусова Н.В., Кузьменко Д.И., Кайгородова Е.В., 2017 - fileskachat.com, быстрое и бесплатное скачивание.

Скачать pdf
Ниже можно купить эту книгу по лучшей цене со скидкой с доставкой по всей России.Купить эту книгу


Скачать - pdf - Яндекс.Диск.




Теги: учебник по биологии :: биология :: Юнусова :: Кузьменко :: Кайгородова :: молекула