Практикум по медицинским биотехнологиям с основами молекулярной биологии, Серебров В.Ю., Кайгородова Е.В., Юнусова Н.В., 2017

Практикум по медицинским биотехнологиям с основами молекулярной биологии, Серебров В.Ю., Кайгородова Е.В., Юнусова Н.В., 2017.

   Данный практикум призван ознакомить студентов с основными методиками проведения биотехнологического эксперимента. Освещён широкий круг возможных направлении использования живых организмов и их систем для продукции необходимого биологического материала, лабораторной диагностики, а так же участия в лечении ряда заболеваний.
В данном пособии представлены классические методы работы с рекомбинантной ДНК. такие как трансформация бактерий, выделение нуклеиновых кислот, полимеразная цепная реакция, электрофорез. А также представлен спектр методик для молекулярно-биологической оценки белковой экспрессии.
Практикум рекомендован для освоения методов генной инженерии и медицинской биотехнологии студентам вузов медицинского и биологического профиля.
Практикум подготовлен в соответствии с федеральным государственным образовательным стандартом высшего образования по специальности 30.05.01 - Медицинская биохимия. Пособие также может быть использовано студентами медицинских и биологических специальностей.




МЕТОДЫ ТРАНСФОРМАЦИИ.
Плазмиды - это внехромосомные автономно реплицирующиеся двухцепочечные кольцевые молекулы ДНК. Плазмиды есть практически у всех бактерий. Одни из них содержат информацию, обеспечивающую их собственный перенос из одной клетки в другую (F-плазмиды), другие несут гены устойчивости к антибиотикам (R-плазмиды) или специфические наборы генов, ответственных за утилизацию необычных метаболитов (плазмиды деградации). Размеры плазмид варьируют приблизительно от -1 до 500 тин.

Как автономно реплицирующиеся генетические элементы, плазмиды обладают всеми основными свойствами, которые позволяют использовать их в качестве вектора для переноса клонируемой ДНК. Автономную репликацию обеспечивает сайт инициации репликации, называющийся точкой ori или ориджином. Каждая плазмида имеет постоянную определенную копийность в клетке - количество молекул на клетку. В зависимости от этого плазмиды делят на высоко- и низкокопийные. Специфичность ориджина определяет круг возможных хозяев, в которых может реплицироваться плазмида. Некоторые плазмиды могут реплицироваться в клетках различных биологических видов. В одной клетке могут сосуществовать только плазмиды, принадлежащие к разным группам совместимости.

ОГЛАВЛЕНИЕ.
Предисловие.
Введение.
ТЕМА 1. Получение рекомбинантных белков и клонированной ДНК с использованием микроорганизмов.
Занятие 1. Методы трансформации.
Лабораторная работа №1. Трансформация бактериальных клеток с использованием хлористого кальция.
Занятие 2. Методы выделения нуклеиновых кислот.
Лабораторная работа №1. Выделение плазмидной ДНК с использованием органических растворителей.
Занятие 3. Методы проведения ПЦР и электрофореза.
Лабораторная работа №1. Полимеразная цепная реакция.
Лабораторная работа №2. Электрофорез ДНК в агарозном геле.
ТЕМА 2. Молекулярно-биологические методы идентификации белковой экспрессии.
Занятие 1. Методы оценки белковой экспрессии: иммунноферментный анализ, вестерн блоттинг, иммунопреципитация.
Лабораторная работа №1. Определение лептина сыворотки крови (с использованием тест-системы Leptm ELISA. DBS. Канада).
Лабораторная работа №2. Приготовление супернатантов ткани для ПФА-анализа и Вестерн блоттинга. Приготовление гелей для Вестерн блоттинга и проведение электрофореза белков по Lemli.
Лабораторная работа №3. Получение экзосом из биологических жидкостей методом иммунопреципитации.
Занятие 2. Оценка белковой экспрессии методами иммунногистохимического окрашивания.
Лабораторная работа №1. Определение уровня пролиферативной активности опухоли методом иммуногистохимии.
Ответы на тестовые задания.
Рекомендуемая литература.



Бесплатно скачать электронную книгу в удобном формате, смотреть и читать:
Скачать книгу Практикум по медицинским биотехнологиям с основами молекулярной биологии, Серебров В.Ю., Кайгородова Е.В., Юнусова Н.В., 2017 - fileskachat.com, быстрое и бесплатное скачивание.

Скачать pdf
Ниже можно купить эту книгу по лучшей цене со скидкой с доставкой по всей России.Купить эту книгу


Скачать - pdf - Яндекс.Диск.




Теги: учебник по медицине :: медицина :: Серебров :: Кайгородова :: Юнусова :: биотехнология